cECL Western Blot Kit

低背景化学发光检测试剂盒

?418.00

CW0048M

250 mL

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低背景化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶（HRP）配套使用的低背景底物检测试剂盒。本产品能够在HRP的催化下发生化学反应而发光，可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测ng级别的抗原，发光信号强烈持久，可以使用X-光胶片曝光或者化学发光成像等仪器进行检测。

低背景化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶（HRP）配套使用的低背景底物检测试剂盒。本产品能够在HRP的催化下发生化学反应而发光，可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测ng级别的抗原，发光信号强烈持久，可以使用X-光胶片曝光或者化学发光成像等仪器进行检测。


保存条件 运输条件
2-8℃，避光保存 常温
Q1：膜上完全无信号或信号极弱，应如何排查？
A1：

若转膜指示条带（如预染Marker）缺失或异常，请检查转膜缓冲液、电极连接及转膜顺序；若Marker正常，则需排查样本中目的蛋白是否存在、是否降解，或验证抗体特异性及稀释比例。

Q2：条带过曝、过粗或信号过强，应如何调整？
A2：

建议降低蛋白上样量、抗体使用浓度、ECL发光液用量或缩短曝光时间，以获取清晰适中的信号强度。

Q3：显影背景过深，可能原因有哪些？
A3：

常见原因为封闭不充分、一抗浓度过高、洗膜不彻底或抗体与封闭剂存在交叉反应，建议系统优化封闭与洗涤步骤，并验证抗体特异性。

Q4：检测灵敏度不足，如何提高？
A4：

可适当延长发光液孵育时间（如2–3分钟）；若为低丰度蛋白检测，建议选用更高灵敏度发光液（CW0049）。

Q5：发光信号持续时间短，如何改善？
A5：

建议将发光液分次、少量滴加于膜上，避免一次性大面积覆盖导致过快消耗；若信号衰减明显，可补加新鲜发光液后再次成像。

Q6：出现非特异性条带，应如何判断与处理？
A6：

若背景干净且信号持续时间正常，多为抗体浓度过高引起，需进一步稀释一抗；若背景脏、信号持续时间短，则可能与HRP过量有关，建议稀释HRP标记二抗。

Q7：膜上出现棕色或黄色条带是何原因？
A7：

此为HRP酶过量导致底物局部快速耗尽所致，建议将HRP标记抗体稀释至少10倍以上，并优化抗体孵育条件。

Sun D, Zhou X, Liu C, et al. Fnr Negatively Regulates Prodigiosin Synthesis in Serratia sp. ATCC 39006 During Aerobic Fermentation. Front Microbiol. 2021, 10.3389/fmicb.2021.734854. PMID: 34603264. (IF:5.64)

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