• eECL Western Blot Kit

    高灵敏度化学发光检测试剂盒

    ?158.00

    CW0049S

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    高灵敏度化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶（HRP）配套使用的的高灵敏增强型检测试剂盒。该产品基于新一代增强型化学发光底物研制而成，在HRP的催化下发生化学反应而发光，可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测pg级别的抗原，发光信号强烈持久，可以使用X-光胶片曝光或者化学发光成像仪进行检测。
    保存条件 运输条件
    2-8℃，eECL-A（Luminol Enhancer）避光保存 常温
    Q1：膜上完全无信号或信号极弱，应如何排查？
    A1：

    若转膜指示条带（如预染Marker）缺失或异常，请检查转膜缓冲液、电极连接及转膜顺序；若Marker正常，则需排查样本中目的蛋白是否存在、是否降解，或验证抗体特异性及稀释比例。

    Q2：条带过曝、过粗或信号过强，应如何调整？
    A2：

    建议降低蛋白上样量、抗体使用浓度、ECL发光液用量或缩短曝光时间，以获取清晰适中的信号强度。

    Q3：显影背景过深，可能原因有哪些？
    A3：

    常见原因为封闭不充分、一抗浓度过高、洗膜不彻底或抗体与封闭剂存在交叉反应，建议系统优化封闭与洗涤步骤，并验证抗体特异性。

    Q4：检测灵敏度不足，如何提高？
    A4：

    可适当延长发光液孵育时间（如2–3分钟）；若为低丰度蛋白检测，建议选用更高灵敏度发光液（CW0049P）。

    Q5：发光信号持续时间短，如何改善？
    A5：

    建议将发光液分次、少量滴加于膜上，避免一次性大面积覆盖导致过快消耗；若信号衰减明显，可补加新鲜发光液后再次成像。

    Q6：出现非特异性条带，应如何判断与处理？
    A6：

    若背景干净且信号持续时间正常，多为抗体浓度过高引起，需进一步稀释一抗；若背景脏、信号持续时间短，则可能与HRP过量有关，建议稀释HRP标记二抗。

    Q7：膜上出现棕色或黄色条带是何原因？
    A7：

    此为HRP酶过量导致底物局部快速耗尽所致，建议将HRP标记抗体稀释至少10倍以上，并优化抗体孵育条件。

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